TransIT-X2® DYNAMIC DELIVERY SYSTEM

高效 — — 完美的广谱转染试剂

实用性广 — — 可以适合用于DNA质粒，siRNA/miRNA以及RNP复合物

科技 — — 非脂质体，阳离子聚合物递送

Mirus X2转染系统通过创新的聚合物体系有效地将DNA和RNA从核内体递送到细胞质中，克服了核酸递送的关键障碍。

如需购买Mirus转染试剂，请联系Mirus授权全国代理欣博盛生物。

图1.TransIT-X2® Dynamic Delivery System可在多种细胞类型中实现较高水平的基因表达

TransIT-X2® Dynamic Delivery System（Mirus Bio）和Lipofectamine®2000转染试剂（Thermo Fisher Scientific）试剂与DNA 3:1将编码荧光素酶的质粒DNA转染到41种不同的细胞类型中。使用标准荧光素酶测定法比较转染后24小时的荧光素素酶的表达。在优化比例下实验结果比较表明，使用TransIT-X2® Dynamic Delivery System（Mirus Bio）在41种细胞类型中的36种细胞中的荧光素酶表达优于或者等于竞争品牌；在17种细胞中TransIT-X2® Dynamic Delivery System是Lipofectamine®2000表达水平的2倍，具体细胞在图中用‡表示。

图2. 使用TransIT-X2® Dynamic Delivery System细胞中GFP表达水平较高

TransIT-X2® Dynamic Delivery System（Mirus Bio）将编码EGFP的质粒DNA转染到A549、CHO-K1、HepG2、LNCaP、MDCK、PC-12、原代人乳腺上皮细胞（HMEC）和原代正常人真皮成纤维细胞（NHDF）。使用4-8μl TransIT-X2®（MirusBio）递送2μg DNA。使用Zeiss Axiovert S100在转染后48小时拍照（32X）倒置荧光显微镜 *代表原代细胞。

图3.使用TransIT-X2® Dynamic Delivery System在多个细胞系和原代细胞中的GFP转染效率较高

使用TransIT-X2® Dynamic Delivery System（Mirus Bio）将编码EGFP的质粒DNA转染到A549、CHO-K1、Hep G2、MDCK、LNCaP、PC-12、原代人乳腺上皮细胞（HMEC）和原代正常人真皮成纤维细胞（NHDF）中。使用0.2-0.4μl TransIT-X2® Dynamic Delivery System（Mirus Bio）在96孔板中进行转染，以递送0.1μg DNA（转染试剂：DNA的比率2:1、3:1或4:1）。转染48小时后，用guava® easyCyte™ 5HT流式细胞仪（MilliporeSigma）对三个孔进行分析。 *代表原代细胞。

图4. 使用TransIT-X2® Dynamic Delivery System转染质粒DNA和siRNA

使用TransIT-X2® Dynamic Delivery System（Mirus Bio）将Cy®5标记的编码核YFP质粒DNA和Cy®3标记的siRNA转染到HeLa细胞。使用4μL TransIT-X2® Dynamic Delivery System（Mirus Bio）在6孔板中用聚-L-赖氨酸（PLL）涂层的盖玻片进行转染，以递送2μg DNA（2:1试剂：DNA比）和25 nM siRNA。使用Alexa Fluor®350 Phalloidin（Thermo Fisher Scientific）对肌动蛋白细胞骨架进行染色。在转染后24小时使用Nikon A1R共焦显微镜拍摄图像（63X）。图像：黄色（核YFP）、蓝色（Cy®5标记的DNA）、红色（Cy™3标记的siRNA）、绿色（肌动蛋白细胞骨架）。

图5. TransIT-X2® Dynamic Delivery System比Lipofectamine®2000具有更高的敲除率

TransIT-X2® Dynamic Delivery System（Mirus Bio）和Lipofectamine®2000转染试剂（Thermo Fisher Scientific）用于转染靶向内源性蛋白GAPDH和aha1的siRNA，或在原代正常人真皮成纤维细胞（NHDF）中递送非靶向对照。根据说明书，使用4μl TransIT-X2® Dynamic Delivery System（Mirus Bio）或6μl Lipofectamine®2000（Thermo Fisher Scientific）和25nM siRNA在6孔板中转染细胞。使用qRT-PCR测定GAPDH或aha1mRNA相对于18S rRNA水平的量，然后在转染后48