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血清引起的细胞生长状态不佳有哪些表现

作者:上海一研生物科技有限公司 2018-11-01T00:00 (访问量:2394)

       血清是一种成分复杂的混合物,且对细胞生长具有促进作用,我们培养细胞离不开血清。那在大规模细胞培养中由血清引起的细胞生长状态不佳及病毒滴度的影响都有哪些表现?
 
1、细胞生长速度缓慢,长满单层时间长;从同一细胞瓶中分出两瓶细胞,用同一种培养液,分别加入10%的对照血清和待检血清,在相同条件下培养72小时,会出现对照血清长满单层,而待检血清大约只有60~70%,这种血清就不适合用来大规模培养细胞。
 
2、细胞传代后形态不正常,细胞状态发生变化 ;由于血清的质量问题,使原本状态正常的细胞经传代后形态会变差;
 
比如:细胞瓶里会出现一些蠕动的小黑点(并非污染),或者细胞表面形成一层油状覆盖物;细胞的轮廓变得模糊,细胞之间的间隙被血清中的蛋白颗粒填充,从而影响细胞向四周扩展生长。
 
3、细胞传几代后就出现脱壁现象,不能连续传代 ;质量较差的血清缺乏某种细胞的贴壁因子,会使细胞在传代过程中逐渐丧失贴壁的能力。细胞会从正常的贴壁状态,边缘开始萎缩,上翘。观察到的现象就是细胞表面不光滑,晃动细胞瓶会看到细胞表面有絮状物随培养液波动。随着传代次数增加,细胞萎缩的情况越来越严重,直到终完全脱壁而死亡。
 
4、细胞长的很好,致密的单层,状态也很正常,但是接毒后细胞基本不发生病变,做滴度检测几乎测不出抗原滴度。这种情况也许是因为 血清中含有与接种的病毒有同源的特异性抗体。
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