杭州环特生物科技股份有限公司

免疫毒性指标有3个：（1）应用转基因中性粒细胞绿色荧光斑马鱼，观察中性粒细胞数量；（2）应用转基因巨噬细胞绿色荧光斑马鱼，观察巨噬细胞数量（荧光强度）；（3）注射红色荧光微球，巨噬细胞吞噬微球排出体外

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斑马鱼与人类具有非常相似的免疫系统，利用转基因荧光标记技术将斑马鱼体内中性粒细胞进行荧光标记，当供试品接触到斑马鱼皮肤时，通过观察中性粒细胞的迁移、聚集数量可以反应其是否温和。

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益生菌通过特异性染色（呈红色），肠道内益生菌增殖的斑马鱼肠道会明显变红，由于斑马鱼通体透明的特点，可以明显被观察到。

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皮肤皱纹的出现与胶原蛋白的正常合成和表达密切相关。通过检测斑马鱼胶原蛋白基因RNA的相对表达量可以反映供试品的抗皱功效。

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【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用抗结肠炎药物的肠腔面积和杯状细胞数量与未加入TNBS的正常对照组相似，并未出现模型对照组的肠腔变大和杯状细胞减少的情况。

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通过紫外光照射使斑马鱼尾鳍形成损伤，添加化妆品后，采用拍照方式对斑马鱼尾鳍进行图像采集，分析斑马鱼尾鳍损伤程度并判定抗光老化功效。

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【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，使用防晒剂组的尾鳍面积、凋亡细胞个数与未照射紫外线的正常对照组比较相似，没有模型对照组尾鳍面积缩小和细胞凋亡增多的情况。2.本实验证实了茶多酚、SOD等

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我们评价斑马鱼行为毒性有4个指标：1.行为学；2.中枢神经凋亡细胞荧光信号强度；3. 外周运动神经长度；4. 脑变性发生率。

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【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，抗氧化剂组的荧光强度比模型对照组弱。2.本实验证实了还原型谷胱甘肽具有明显抗氧化功效。

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1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用胃肠调节剂组的胃肠道荧光情况比模型对照组明显减弱。2.本实验证实了多潘立酮（吗丁啉）具有明显的胃肠调节功效。

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