总IgE 定量检测试剂盒（酶联免疫法）
说 明 书
作者： 江彬
Tel : 1991-4747-194
【产品名称】
通用名：总IgE定量检测试剂盒（酶联免疫法）
【包装规格】96人份/盒；48人份/盒
【预期用途】
本试剂盒用于定量检测人血清/血浆中存在的总IgE水平，对过敏性疾病的病因诊断有重要的参考价值。
免疫球蛋白E（IgE）在血清中的浓度极低，约占免疫球蛋白的0.002%，主要存在于血管、皮肤、黏膜中，一般认为由鼻咽、扁桃腺、支气管、胃肠道粘膜基底的浆细胞产生，能与肥大细胞及血液中的嗜碱性多形核粒细胞结合。当过敏原与结合在细胞上的IgE作用后，就使促进细胞脱颗粒，释放组胺，从而引起过敏反应，如血清病、花粉热等速发型变态反应。IgE在新生儿体内含量极少，一般细菌与病毒感染对IgE影响不大。IgE增高常见于过敏性哮*、寄生虫感染、季节性过敏性鼻炎、肺支气管曲霉病、药物过敏、IgE型骨髓瘤、肝脏疾病、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等病。减少则常见于某些运动失调毛细血管扩张症、无丙种球蛋白血症、非IgE型骨髓瘤、慢性淋巴性白血病、免疫功能不全等疾病。
【检验原理】
本试剂盒采用亲和素-生物素化IgE单克隆抗体预包被板ELISA 原理，定量检测人血清/血浆中存在的总IgE水平，配以酶标记抗人IgE单克隆抗体作为标记物。加入底物TMB显色后终止反应，在450nm波长测各孔O.D值，O.D值的大小与待检抗体含量成正比。生物素系统（biotin-avidin system）的稳固级联放大作用，使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提高，并使反应时间明显缩短，整个过程在2小时内可以完成，具有简单、快速的特点。
【主要组成成份】
1、预包被反应板 1块
2、阴性对照 1瓶
3、阳性对照 1瓶
4、标本稀释液 1瓶（20 ml/10ml）
5、酶结合物 1瓶（12/6ml，直接使用）
6、标准品（10、50、100、200、400IU/ml各一支）
0.8/0.4 ml
7、30X浓缩洗液
1瓶（20/10ml，加蒸馏水1：30稀释使用）
8、显示剂A、B液 各1瓶（6/3ml）
9、终止液（2M H2SO4） 1瓶（6/3ml）
10、说明书 1份
【贮存条件及有效期】
2-8℃密封保存，避免冻结。有效期10个月。
【适用仪器】
各类国产和进口酶标仪均可使用，检测波长450nm。
【样本要求】
1、 尽量用新鲜标本，如需保存，可于2-8℃冷藏48小时或-20℃冻存4周（样本应避光）。避免反复冻融（3次以上）。
2、 避免用溶血、混浊或脂血标本。
3、 样本若需运输，应保持2-8℃或冻存状态。
4、 标本中避免加入抗凝剂或保护剂或防腐剂，以免影响试验结果。
【检验方法】
1. 试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封后置于板 架上。
2. 加样：于各待检标本反应孔中加入80ul 标本稀释液，然后加入20 ul各待检标本。设阴、阳性对照（100ul/孔，不稀释）、空白孔（加入100ul标本稀释液）及标准品（100ul/孔，不稀释）各1孔。标准品建议做双孔。
3. 37℃温育60分钟。甩去孔内液体，用洗涤液洗
板3次并在吸水纸上拍干。
4. 加酶结合物：每孔2滴（或100ul），混匀后置37℃温育30分钟。同上法洗涤3次并拍干。
5. 显色：每孔加显色剂A、B各1滴（或50ul），轻拍混匀（或震荡器混匀）后置37℃10分钟。
【检验结果的解释】
1. 酶标仪测定：每孔加终止液1滴（或50ul），混匀后在450nm下测定各孔O.D值。
2. 以5支标准品的O.D值为纵坐标，其浓度（10、50、100、200、400IU/ ml）为横坐标，做标准曲线。待检标本的O.D值在标准曲线上所对应的浓度即为该标本的实际含量。建议标准品做双孔，取O.D值均值。
[参考值（参考范围）]
正常人体内IgE含量在20~200IU/ml之间。待测标本中总IgE含量大于200IU/ml即表示总IgE升高，与过敏有关；小于200IU/ml则表示总IgE属正常范围。
[检验方法的局限性]
1、本试剂盒检测结果只作为辅助诊断，疾病的确诊需要结合临床症状/体征和其他检查方法方可做出判断。
2、待检标本的总IgE含量大于400IU/ml时为非线性，若要得到准确值，需要进一步稀释标本并结合考虑相应的稀释度。
[产品性能指标]
1、 阴性符合率：对质控阴性标本的检出率为100%。
2、 阳性符合率：对质控阳性标本（含低值阳性标本）的检出率为100%。
3、 重复性：批内、批间变异系数均＜10%。
【注意事项】
1、 试剂盒仅供体外诊断用。
2、 微孔板须密封防潮，从冷藏环境中取出时，应置室温平衡至潮气尽干后方可开启使用，余者封存置2-8℃短期内用完。
3、 滴加试剂前应将滴瓶翻转数次混匀，滴加时保持瓶身垂直。
4、 洗涤时每孔均须加满，防止孔内有游离酶不能洗净。
5、 试剂置2-8℃存放，不能冻结。
6、 本试剂盒中阴阳性对照虽不含人源性血清成分，但应严格按常规作为污染物处理。
【参考文献】